- 陈凤花;胡丽华;王琳;李一荣;周志明;
目的:建立SYBR GreenI实时荧光PCR定量检测人类EZH2基因的方法。方法:将EZH2 RT-PCR扩增片段克隆入载体pGEM-T后,经测序鉴定正确后,进行纯化和定量及系列稀释,应用SYBR GreenI实时荧光定量PCR检测EZH2,建立标准曲线,熔解曲线分析产物的特异性。结果:该法检测的最低拷贝数为10,线性范围为101~108拷贝,相关系数r为-1.00,104copies/μl标本的批内变异系数(CV)和日间CV分别为1.0%和2.7%。熔解曲线分析显示单一的峰,熔解温度(Tm)为(83.42±0.13)℃。结论:实时荧光定量PCR方法检测EZH2基因,具有高敏感性、高特异性和高精确性等优点,可作为进一步研究EZH2的方法。
2007年06期 No.15 243-246页 [查看摘要][在线阅读][下载 179K] [下载次数：0 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：83 ] - 胡丽华;汤兆明;李一荣;王琳;窦丽芳;熊娟;
目的:构建血型A抗原模拟多肽融合表达载体,初步鉴定融合表达蛋白结合抗A抗体的能力。方法:PCR扩增血型A抗原模拟多肽(P17)和谷胱苷肽S-转移酶(GST)编码基因,并连接成P17-GST。双酶切后克隆入原核表达质粒pET28b,酶切、测序鉴定。以BL21(DE3)为表达菌,在IPTG诱导下表达P17-GST融合蛋白,Ni-NTA柱纯化蛋白。红细胞凝集抑制实验分析融合蛋白模拟血型A抗原的能力。结果:成功构建P17基因和GST基因融合的原核表达质粒pET28b-P17-GST,目的基因可以高效表达,纯化的融合蛋白以浓度依赖的方式抑制A型红细胞的凝集作用。结论:血型A抗原的模拟多肽序列与GST的融合表达蛋白可特异性结合抗A抗体,具有替代血型A多糖抗原潜能,为发展新型的抗A抗体滤除材料提供了依据。
2007年06期 No.15 247-250页 [查看摘要][在线阅读][下载 516K] [下载次数：0 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：82 ] - 饶神宗;陈凤花;胡丽华;曹奎杰;
目的:探讨适合于实时荧光PCR技术筛查我国献血者和受血者的血浆池的大小,筛查HBV和HCV免疫学检测阴性的受血者和献血者血液标本,以期发现肝炎病毒血清转换前窗口期的血液标本。方法:用实时荧光定量PCR检测不同拷贝数的HBV DNA和HCV RNA;检测2006年3月~2007年3月期间协和医院接受输血且乙肝三系和丙肝检测结果为阴性的受血者标本,同时检测2006年4月~2006年7月期间孝感市血液中心乙肝三系和丙肝检测结果为阴性的无偿献血者。结果:不同拷贝数的阳性混合标本在1∶24稀释时,HBV DNA和HCV RNA的检测均为阳性;当滴度大于等于1∶48时,则出现了假阴性结果。2006年3月~2007年3月期间协和医院2142名接受输血且所有ELISA检测结果为阴性的患者进行核酸检测,HBV DNA荧光定量测定有2份标本阳性,HCV RNA荧光定量检测没有发现阳性标本;2006年4月~2006年7月期间孝感市血液中心1121名ELISA检测HBV和HCV结果为阴性的无偿献血者进行核酸检测,没有发现阳性标本。结论:采用24份标本混合组成一个检测池进行血液筛查,既准确又经济。
2007年06期 No.15 251-253+256页 [查看摘要][在线阅读][下载 135K] [下载次数：0 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：87 ] - 何峰容;程欣;沈关心;王夜明;
目的:探讨武汉地区原发性高血压(EH)代谢综合征(MS)与血管紧张素转换酶(ACE)基因插入/缺失(I/D)多态性的关系。方法:701例武汉地区汉族人群分为3组,其中血压正常对照组303人,EH患者398例,其中EH患者中符合代谢综合征者189例,不伴随代谢综合组209例。应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法测定3组人群中ACEI/D基因多态性。结果:①ACE各基因型频率在正常对照组与EH(包括MS与非MS组)组间差异无统计学意义;②ACEII基因型EH合并MS患者的胆固醇水平明显高于DD基因型。结论:ACE基因多态性与武汉地区原发性高血压无关,但D等位基因频率明显低于某些西方国家人群;对于EH合并代谢综合征的患者,其胆固醇水平和ACEII基因型明显相关。
2007年06期 No.15 254-256页 [查看摘要][在线阅读][下载 110K] [下载次数：0 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：74 ] - 王武明;
目的:探讨恶性淋巴瘤(ML)患者血清乳酸脱氢酶(LDH)、β2-微球蛋白(β2-MG)测定的临床意义。方法:对48例ML患者分别采用速率法及放免法测定血清LDH、β2-MG水平。结果:Ⅰ加Ⅱ期与Ⅲ加Ⅳ期ML患者LDH值比较差异无统计学意义(P>0.05),而β2-MG差异显著,高度恶性与中、低度ML患者的LDH值比较差异有统计学意义(P<0.05),β2-MG值比较差异无统计学意义。有无B组症状患者、有无骨髓浸润患者相比血清LDH、β2-MG值明显升高,2者比较差异有统计学意义(P<0.01)。而经化疗缓解者水平均显著下降(P<0.01)。结论:血清LDH、β2-MG对ML患者分期、恶性程度、有无骨髓浸润、疗效判断及预后有参考价值。
2007年06期 No.15 257-259页 [查看摘要][在线阅读][下载 97K] [下载次数：0 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：77 ] - 王雷萍;孟庆宝;周铮;
目的:探讨RhD抗体检测的意义及微柱凝胶检测技术的优越性。方法:用微柱凝胶抗人球法和试管抗人球法对47例RhD阴性围产期孕、产妇平行检测,观察检出率,并比较2种方法的灵敏度。结果:对选定的阳性对照物检测,试管法抗人球的检出1+的释稀度为1∶16,而微柱凝胶法为1∶64。47例RhD阴性围产期孕、产妇静脉血,传统的试管法检出RhD抗体阳性10例(21.28%),微柱凝胶法检出阳性12例(25.53%)。结论:微柱凝胶法操作简单,灵敏度高,在Rh-D抗体检测中优于传统的试管法抗人球技术。
2007年06期 No.15 260-262页 [查看摘要][在线阅读][下载 95K] [下载次数：0 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：82 ] - 章金灿;陈立华;何淦生;许洁;
目的:探讨微柱凝胶法(MGT)和凝聚胺法(MPT)在尿毒症患者交叉配血中的应用价值。方法:采用MGT和MPT对需输血的56例尿毒症患者进行交叉配血试验。结果:在56例尿毒症患者258例次交叉配血中,MGT结果主侧凝集2例(0.8%),次侧凝集49例次(19.0%);MPT结果主侧凝集2例(0.8%),次侧凝集8例次(3.1%)。其中MGT次侧凝集49例次做直接抗人球蛋白试验全部阳性。结论:尿毒症患者长期、多次输血后,存在抗体的不规则性,在MGT中,致敏RBC会导致配血困难,结合MPT进一步了解凝集的性质,提高输血的安全性。对MGT交叉配血次侧阳性采用MPT交叉配血有很好的互补性。
2007年06期 No.15 262-263页 [查看摘要][在线阅读][下载 61K] [下载次数：0 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：85 ] - 吕晓华;
目的:探讨2型糖尿病(T2DM)并发冠心病(CHD)患者血浆总同型半胱氨酸(tHcy)、血小板参数(PLT、PCT、MPV、PDW)变化的临床意义。方法:将92例T2DM患者分为无并发CHD组(52例)和并发CHD组(40例),分别检测其血浆tHcy、PLT、PCT、MPV、PDW水平,并与健康对照组(56例)比较。结果:T2DM组的tHcy、MPV、PDW、FPG明显高于对照组(P<0.01),PLT显著低于对照组(P<0.01),PCT与无并发CHD组差异无统计学意义(P>0.05);T2DM并发CHD组tHcy、MPV、PDW明显高于无并发CHD组(P<0.01),PLT显著低于无并发CHD组(P<0.01),PCT、FPG与无并发CHD组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:T2DM患者,定期检查血小板参数和tHcy水平,并进行针对性的治疗,将有助于T2DM并发CHD的防治。
2007年06期 No.15 264-266页 [查看摘要][在线阅读][下载 98K] [下载次数：0 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：86 ] - 郭建光;陈琛;
目的:建立泰安市RhD抗原阴性无偿献血者表型库,保证临床需求。方法:应用微板血型血清学方法对献血者进行RhD抗原筛选,采用试管法进行RhD抗原阴性确认,用分型血清进行RhD阴性表型分型。结果:89860名献血者中检出RhD抗原阴性者352名,占0.39%,RhD抗原变异者10名,占0.01%。d基因频率为0.0626,D基因频率为0.9374,以ccdee所占比例最多,为57.39%,cde基因频率为0.0474,其次为Ccdee占33.80%,其他表型则少见或罕见,其分布特征为ccdee>Ccdee>CCdee>ccdEe>CcdEe>CCdEe>ccdEE。结论:进行RhD抗原阴性无偿献血者表型分型,对于安全输血具有重要意义。
2007年06期 No.15 266-267页 [查看摘要][在线阅读][下载 56K] [下载次数：0 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：89 ]
- 佘朝晖;邓丽娟;郑军华;
目的:了解咸宁市内无偿献血者梅毒分布情况,指导无偿献血工作的开展,减少血液报废,确保血液安全。方法:对21621名无偿献血者的血液进行梅毒抗体检测。对阳性结果进行调查分析。结果:梅毒抗体阳性率为0.49%,其中男性0.58%,女性0.36%(χ2=0.82,P<0.05),男性高于女性;不同年龄组,不同文化程度及不同地域之间差异有统计学意义。结论:我市3个地区,高中及中专文化程度,31~40岁男性人员为献血的高危人群,在献血前需对其进行梅毒抗体初筛检查。
2007年06期 No.15 268-269页 [查看摘要][在线阅读][下载 52K] [下载次数：0 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：105 ] - 刘爱国;
目的:对肾功能不全患者血液透析后输血反应分类分析。方法:肾功能不全患者血液透析后输注全血,红细胞悬液,去白细胞红细胞悬液3种治疗方法后出现输血反应进行对照统计。结果:输入去白细胞红细胞悬液后,通过发热反应、过敏反应、溶血反应、阻塞性肺梗塞等方面比较,效果明显优于其他2法。结论:肾功能不全者血液透析后使用去白细胞红细胞悬液效果比较满意。
2007年06期 No.15 269-270页 [查看摘要][在线阅读][下载 52K] [下载次数：0 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：95 ] - 张凤杰;李梅芳;冀玉鲜;
目的:探讨凝血因子Ⅻ活性(FⅫ:C)的变化对纤维蛋白原溶解功能与深静脉血栓形成(DVT)的影响。方法:采用一期法测定63例DVT患者和30例正常对照组的FⅫ:C,同时用发色底物法检测血浆纤溶酶原活性(PLG:A),酶联免疫法测定组织型纤溶酶原激活物抗原性(t-PA:Ag)纤溶酶原激活物抑制剂-Ⅰ抗原性(PAI-Ⅰ:Ag)及免疫比浊法测定血浆D-二聚体(D-D)含量。结果:DVT组FⅫ:C和PLG:A含量显著低于正常对照组(P<0.01),其中5例(7.9%)年龄<45岁的患者FⅫ:C低于正常对照组x-2S;PAI-Ⅰ:Ag,D-D含量显著高于正常组(P<0.01);t-PA:Ag含量与正常对照组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:FⅫ:C下降易导致纤溶酶原内激活途径受抑制,DVT的形成与FⅫ:C降低有关。
2007年06期 No.15 270-271页 [查看摘要][在线阅读][下载 56K] [下载次数：0 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：87 ] - 彭秀春;柯卫泽;杨贵平;杨毓明;
目的:探讨单采血小板献血者的招募和管理工作方法,建立低危、稳固的单采血小板自愿无偿献血者队伍,确保临床急救用血需求。方法:招募宣传注重针对性,招募工作贯穿人性化服务和实施制度化、程序化管理。结果:建立单采血小板自愿无偿献血者队伍,实现临床单采血小板用血自愿无偿献血率100%。结论:采取多样灵活的宣传途径,有针对性加强宣传和坚持人性化的服务理念以及严格执行规范化的管理程序,是单采血小板献血者的招募和管理工作步入健康、持续发展轨道的关键所在。
2007年06期 No.15 272-273页 [查看摘要][在线阅读][下载 51K] [下载次数：0 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：83 ]